柱層析的裝柱非常重要,裝柱的效果會(hui) 直接影響層析分離效果。有濕法裝柱和幹法裝柱等兩(liang) 種方法。濕法裝柱很簡單,使用也普遍, 就是先用比固定相多一倍的洗脫劑將固定相活成勻漿,柱子底部先用脫脂棉塞緊, 然後倒入洗脫劑將脫脂棉中氣泡趕出。
用漏鬥將活好的固定相倒入柱子中, 打開底部活塞, 將柱子中高出固定相的溶劑放出。期間不斷用橡皮棒敲打, 將固定相敲實, 做到密實均勻無氣泡即可。
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很多時候用加壓的方法可以很高效地裝好柱子,而且在柱子中沒有氣泡產(chan) 生。
幹法裝柱與(yu) 濕法裝柱剛好相反的是,它是將幹燥的吸附劑從(cong) 柱子上端直接加入到一個(ge) 空的柱子中, 然後用油泵抽柱子底部, 相當於(yu) 減壓過柱, 直到柱子變得很結實, 再用淋洗劑“走柱子” 。
幹法裝柱的一個(ge) 缺點就是在裝入洗脫劑後, 由於(yu) 溶劑和固定相之間的吸附放熱, 所以柱子容易變花,影響分離效果。
解決(jue) 的方法是:
(1)固定相一定要添加結實;
(2)一定要用較多的溶劑“走柱子”,直到柱子的下端不再發燙, 恢複到室溫後再撤去壓力。無論使用哪種方法裝柱,最後都要求所裝的柱子結實、勻稱、無氣泡。
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