高壓製備色譜準備工作要做哪些

 　　製備色譜簡單來說，就是在化學化工醫藥等廣泛采用的層析法以及薄層色譜。本文介紹下高壓製備色譜的目的以及需要做哪些準備工作。

　　高壓製備色譜的目的：

　　製備色譜的目的，是從(cong) 混合物中得到純物質。為(wei) 了加快分離的時間與(yu) 提高分離的效率，製備色譜的的進樣品量很大，導致製備色譜柱子的分離負荷的相應加大，也就必須加大色譜柱填料，增大製備色譜的直徑和長度，使用的相對多的流動相。然而，當色譜柱上樣品負載加大的時候，往往導致柱效急劇下降而得不到純的產(chan) 品。製備色譜，要解決(jue) 容量與(yu) 柱子效果之間的矛盾，對重現性也要考慮。從(cong) 經濟上來說，高壓製備色譜要爭(zheng) 取少用填料，少用溶劑，要盡可能多的得到產(chan) 品。

　　高壓製備色譜需要做的部分準備工作：

　　1.樣品的前處理：高壓製備色譜柱子由於(yu) 處理的樣品多，比分析柱子更容易受汙染，所以必要的前處理就顯得非常的必要。萃取、過濾、結晶、固相萃取等簡單的分離方法，如果用得上，而且還不是很麻煩，就要盡可能多的采用以去掉雜質。

　　2.固定相的選擇：矽膠、鍵合固定相(如C18)、離子交換樹脂、聚酰胺、氧化鋁、凝膠等都可以作為(wei) 色譜柱的填料。有不少文獻報道，對填料可以進行一下處理提高了分離效果，如，對矽膠進行的硝酸銀(或緩衝(chong) 液)處理。

　　3.裝柱方法的選擇：根據固定相顆粒度和柱子的尺寸，采用不同的裝柱方法，往往裝填越好分離效果越好。裝柱效果跟填料的顆粒度關(guan) 係很大，顆粒度的減少會(hui) 導致裝柱的難度。一般來說，顆粒直徑小於(yu) 20-30um的固定相采用濕法裝填。所謂“敲擊-裝填”技術適用於(yu) 顆粒直徑大於(yu) 25um的固定相。

　　濕法的目的是迫使相對稀鬆的固定相懸漿以高速裝入色譜柱子，從(cong) 而減少空隙的形成。然而，當柱直徑大於(yu) 20mm，所加壓力為(wei) 30-40bar時，高壓懸漿裝填技術就變得十分複雜。為(wei) 將小顆粒固定相裝入更大得製備型色譜柱，可采用柱長壓縮技術。這種方法，先將固定相懸漿(或偶爾是幹填充物)裝入柱中加壓，利用物理方法將其壓緊。

　　壓緊的方法有兩(liang) 種：徑向壓縮和軸向壓縮。濕法裝柱需要一定的設備，在柱子填完後，應用有柱效的測量，對柱效低的柱子應該重填。

　　4.流動相的選擇：除了和分析色譜同樣的考慮外，在選用流動相時，要考慮色譜分離後麵加有旋轉蒸發等二次分離操作。一般來說，不宜采用高毒性溶劑，對多元溶劑要盡可能的少用。如果產(chan) 品中含有大量溶劑，溶劑的純度也要考慮在其中。

　　5.加樣的方法：一般的進樣方法有用注射器進樣，用旋轉閥進樣，通過六通閥進樣，通過主泵進樣，通過輔泵進樣，固體(ti) 上樣。

　　6.泵的選用：根據有無脈衝(chong) 、能承受的zui大壓力、控製的精度、售後服務等來選擇泵。

　　7.檢測器的選用：一般的分析池的zui大允許流速僅(jin) 為(wei) 5 mL/min 或者10mL/min。而專(zhuan) 門的製備池的zui大允許流速可為(wei) 150mL/min。有時，采用旁路分離管，將少量流體(ti) 導入分析池進行檢測，是一個(ge) 不錯的辦法，但其濃度的誤差會(hui) 相對較大。

　　其他還有產(chan) 品收集，分離以及柱轉換等等就不再一一詳述了，如果您有興(xing) 趣了解更多高壓製備色譜的信息，米兰官方网站下载。