黃曲黴素分析儀（光化學）

1、提取步驟
取供試品粉末約15.0 g(過二號篩)，精密稱定，加入氯化鈉3.0 g，置於(yu) 均質瓶中，精密加入70%甲醇溶液75.0 mL，高速攪拌2 分鍾（攪拌速度大於(yu) 11, 000 轉/分），離心5 分鍾(離心速度2500 轉/分)，定性濾紙過濾、然後精密量取上清液15.0 mL，置50 ml 量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，量取續濾液20.0 mL，待淨化。

混合對照品溶液的製備：精密量取黃曲黴毒素混合標準品（黃曲黴毒素B1、B2、G1、G2 標示濃度分別為(wei) 1.0 μg/ml、0.3 μg/ml、1.0 μg/ml、0.3 μg/ml）0.5 ml，置10 ml 量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，作為(wei) 儲(chu) 備液。

2、免疫親(qin) 和SPE 柱淨化步驟淨化
SPE 柱：黃曲黴毒素免疫親(qin) 和柱（3 mL）
1）回溫解凍：提前半個(ge) 小時將黃曲黴毒素免疫親(qin) 和柱從(cong) 冰箱拿出常溫解凍；
2）上樣：準確移取20mL提取好的樣品溶液注入免疫親(qin) 和柱，使溶液以1滴/S的速度通過免疫親(qin) 和柱，直至2mL-3mL 空氣通過柱體(ti) ，棄去流出液；
3）淋洗：用20mL水淋洗免疫親(qin) 和柱，流速為(wei) 1滴/s--2 滴/s，淋洗兩(liang) 次。直至空氣進入免疫親(qin) 和柱，直至2mL-3mL空氣通過柱體(ti) ，棄去全部的流出液，抽幹小柱；
4）洗脫：準確加入1.0 mL 甲醇洗脫，流速約為(wei) 1滴/s，收集全部的洗脫液於(yu) 幹淨的離心管中，用甲醇-乙腈-水(40: 18: 42)定容至2mL，供液相色譜測定。
注：1）進行加標回收率實驗時，當樣品用提取液提取完成，並用定量濾紙過濾之後即進行加標，然後進行免疫親(qin) 和柱淨化等後續的處理。
2）黃曲黴毒素標準溶液的稀釋，必須要用用流動相甲醇-乙腈-水(40: 18: 42)進行稀釋，否則峰型極為(wei) 不理想，這是本實驗過程中的一個(ge) 非常重要的小細節。
3）進行加標回收率實驗時，取50μL 儲(chu) 備液，用流動相定容至2mL 即的。

3、色譜條件(光化學衍生方法)
色譜柱：C18,4.6×250mm, 5 μm，
流動相：甲醇-乙腈-水(40: 18: 42)
流速：0.8 mL/min
柱溫：30 oC
進樣量：20 μL
檢測波長：Ex = 360 nm，Em = 450 nm

4.色譜圖或者加標回收率結果

圖1：陳皮項目四種黃曲黴毒素標準樣品色譜圖（從(cong) 左到右依次為(wei) G2，G1，B2，B1，濃度為(wei) 0.75ppb，2.5 ppb，0.75 ppb，2.5 ppb）

                               圖2：陳皮樣品色譜圖

圖3：陳皮樣品加標色譜圖（從(cong) 左到右依次為(wei) G2，G1，B2，B1，加標濃度為(wei) 0.75ppb，2.5 ppb，0.75 ppb，2.5 ppb）

圖4：胖大海項目四種黃曲黴毒素標準樣品色譜圖（從(cong) 左到右依次為(wei) G2，G1，B2，B1，濃度為(wei) 0.75 ppb，2.5 ppb，0.75 ppb，2.5 ppb）

                           圖5：胖大海樣品色譜圖

圖6：胖大海樣品加標色譜圖（從(cong) 左到右依次為(wei) G2，G1，B2，B1，加標濃度為(wei) 0.75 ppb，2.5 ppb，0.75 ppb，2.5 ppb）

圖7：僵蠶項目四種黃曲黴毒素標準樣品色譜圖（從(cong) 左到右依次為(wei) G2，G1，B2，B1，濃度為(wei) 0.75 ppb，2.5 ppb，0.75 ppb，2.5 ppb）

                  圖8：僵蠶樣品色譜圖

圖9：僵蠶樣品加標色譜圖（從(cong) 左到右依次為(wei) G2，G1，B2，B1，加標濃度為(wei) 0.75ppb，2.5 ppb，0.75 ppb，2.5 ppb）

圖10：酸棗仁項目四種黃曲黴毒素標準樣品色譜圖（從(cong) 左到右依次為(wei) G2，G1，B2，B1，濃度為(wei) 0.75 ppb，2.5 ppb，0.75 ppb，2.5 ppb）

               圖11：酸棗仁樣品色譜圖

圖12：酸棗仁樣品加標色譜圖（從(cong) 左到右依次為(wei) G2，G1，B2，B1，加標濃度為(wei) 0.75 ppb，2.5 ppb，0.75 ppb，2.5 ppb）

圖13：桃仁項目四種黃曲黴毒素標準樣品色譜圖（從(cong) 左到右依次為(wei) G2，G1，B2，B1，濃度為(wei) 0.75 ppb，2.5 ppb，0.75 ppb，2.5 ppb）

                    圖14：桃仁樣品色譜圖

圖15：桃仁樣品加標色譜圖（從(cong) 左到右依次為(wei) G2，G1，B2，B1，加標濃度為(wei) 0.75 ppb，2.5 ppb，0.75 ppb，2.5 ppb）

光化學衍生器
光化學柱後衍生反應器廣泛應用於(yu) 液相色譜檢測分析，使用時置於(yu) 色譜柱和檢測器之間，進行柱後連續光化學衍生反應提高熒光、紫外、電化學檢測和化學發光檢測器的靈敏度和響應的選擇性。
采取液相色譜-熒光法檢測黃曲黴毒素時，使用光化學衍生器進行柱後衍生，不需要任何化學試劑，能
有效增強黃曲黴毒素B1 和G1 的熒光強度，黃曲黴毒素B1 和G1 靈敏度能夠達到0.5ppb以下。光化學柱後衍生光化學反應裝置除應用於(yu) 黃曲黴毒素檢測外, 還可以應用於(yu) 大量的巴比妥酸鹽、氨基酸、多肽、黃曲黴毒素、維生素及磺胺類藥物等分析。

產(chan) 品參數
貨號：00782-0043 ；
運行環境溫度5℃～40℃；
相對濕度≤85%；
適用電壓220V(±10%)，50Hz(±2%)
zui大流速1-2ml/min；
符合AOAC 2005.08, AOAC 2008.02, AOCS Aa 11-05，中國台灣標準（食字0981800370 號公告）和歐盟藥典2.8.18 標準分析方法，中國藥典（中國藥典增訂光化學衍生法）。